نمونه خون بیمار گرفته و سرم جدا میگردد. آزمایش غربالگری اولیه معمولا یک تست غیر ترپونمال است، مانند تست VDRL یا RPR (Rapid Plasma Reagin) و آنتی بادی هایی را شناسایی می کند که با کاردیولیپین، ماده ای که در بافت های بیماران مبتلا به سیفلیس و سایر بیماری ها یافت می شود، واکنش می دهد. اگر این تست مثبت باشد، آنتی بادی های سیفلیس وجود دارند. برای تایید آن، یک تست ترپونمال انجام می شود، مانند تست TPHA (Treponema Pallidum Hemagglutination Assay) یا FTA-ABS (جذب آنتی بادی ترپونمال فلورسنت). این تست ها به صورت اختصاصی آنتی بادی ها را علیه باکتری ترپونما پالیدوم شناسایی می کنند. نتایج دو تست با یکدیگر بررسی میگردند و مثبت شدن تست غیر ترپونمال و سپس تست ترپونمال مثبت تشخیص سیفلیس را تایید می کند.