خون بیمار گرفته شده و سرم جداسازی میشود. سپس سرم با محلولی حاوی آنتی ژن مشتق شده از T.pallidum مخلوط می شود. وقوع آگلوتیناسیون در مخلوط مشاهده می شود که عبارت است از کلوخه ای شدن ذرات. اگر سرم بیمار حاوی آنتی بادی علیه T.pallidum باشد، آنتی بادی ها با آنتی ژن واکنش داده و باعث ایجاد کلوخه یا clumping می شوند. میزان آگلوتیناسیون با مقدار آنتی بادی های موجود ارتباط مستقیم دارد. نتایج بر اساس میزان آگلوتیناسیون گزارش خواهد شد. نتیجه مثبت نشان دهنده وجود آنتی بادی های سیفلیس است که نمایانگر عفونت سیفلیس کنونی یا قبلاً است و آزمایشهای بعدی مانند تست ترپونمال (مثلاً FTA-ABS یا TP-PA) برای تایید تشخیص انجام میشوند.